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英文名稱：Reactive Oxygen Species Assay Kit

產(chǎn)品內(nèi)容：

產(chǎn)品參數(shù) Ex/Em: 504/529 nm 

貯存條件 -20℃避光保存，有效期見外包裝。

產(chǎn)品介紹 

DCFH-DA (二氯二氫熒光素-乙酰乙酸酯) 本身無熒光，可自由透過活細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，并被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解，形成 DCFH，DCFH 無熒光且不能通透細(xì)胞膜，從而被細(xì)胞內(nèi)的活性氧氧化生成有熒光的 DCF。根據(jù)活細(xì)胞中熒光的產(chǎn)生，可以判斷細(xì)胞活性氧的含量和變化。用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察，是一種經(jīng)典的組織或活細(xì)胞中活性氧檢測方法。Rosup 為活性氧陽性誘導(dǎo)藥物，根據(jù)其熒光信號強(qiáng)度，可分析活性氧的真正水平。

注意事項(xiàng) 

1. 陽性對照 Rosup 一般使用濃度為 100 μM （推薦濃度 100-400μM，具體依細(xì)胞類型而定）。通常刺激后 30 min-4 h 可以觀察到顯著的活性氧水平升高。對于不同的細(xì)胞，活性氧陽性對照的效果可能有較大的差別。如果在刺激后 30 min 內(nèi)觀察不到活性氧的升高，可延長誘導(dǎo)時間或適當(dāng)提高活性氧陽性對照的濃度。如果活性氧升高得過快，可縮短誘導(dǎo)時間或適當(dāng)降低活性氧陽性對照的濃度。 

2. 實(shí)驗(yàn)過程中，如果發(fā)現(xiàn)沒有刺激的陰性對照細(xì)胞熒光也比較強(qiáng)，可以按照 1:2000-1:5000 稀 釋 DCFH-DA ，使 DCFH-DA 的終濃度為 2-5 μM。探針裝載的時間也可以根據(jù) 情況在 15-60 min 內(nèi)適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整。 

3. 活性氧陽性對照 (Rosup) 僅僅用于作為陽性對照的樣品，并不是在每個樣品中都需加入活性氧陽性對照。 

4. 探針裝載后，一定要洗凈殘余的未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的探針，否則會導(dǎo)致背景較高。